假陰性判斷:造成假陰性結(jié)果的原因有很多,主要體現(xiàn)在FAM擴增曲線不起來更適合,原因包括標本抑制溝通機製,核酸提取失敗至關重要,基因突變以及儀器故障等通過活化。 目前國內(nèi)主流PCR試劑都不帶內(nèi)標監(jiān)控功能建立和完善,用于檢測目標基因的FAM擴增曲線既用來定量又用于定性(判斷陰陽性)新技術,因此FAM擴增曲線的好壞非常關鍵增產。對于此類無內(nèi)標試劑便利性,建議結(jié)合乙肝血清標志物結(jié)果(五項定量/定性結(jié)果)來判斷陰陽性,即使是FAM曲線有擴增也應該參考此結(jié)果行動力,特別是E抗原結(jié)果提供有力支撐。同時,對于擁有競爭性內(nèi)標監(jiān)控功能的試劑來說良好,可有以下四種情況發(fā)生:如FAM無擴增逐步顯現,內(nèi)標有擴增:結(jié)果正常,判斷該樣本為陰性結(jié)果引領;如FAM無擴增自動化裝置,內(nèi)標也無擴增:結(jié)果異常,可能原因核酸提取失敗或有抑制應用前景,一定要重復實驗有很大提升空間;如FAM有擴增,內(nèi)標有擴增:結(jié)果正常首次,因為待測核酸和內(nèi)標在同一反應體系下擴增可能性更大;如FAM有擴增,內(nèi)標無擴增:結(jié)果正常搖籃,強陽性樣本會抑制內(nèi)標的擴增技術,導致內(nèi)標結(jié)果偏弱或陰性。 假陽性判斷(如何判定):臨床PCR檢測當中造成假陽性結(jié)果的情況比較少推動,原因包括試劑污染相對較高,氣溶膠污染,操作污染信息,擴增產(chǎn)物污染相關,非特異性擴增,耗材污染等豐富內涵,所以建議一定要做陰性對照來監(jiān)控是否存在污染生產效率。